我們注意到許多實驗者在使用ProteanFect Max轉染試劑盒時,往往容易忽視一個至關重要的步驟——充分混勻!
今天,我們特別強調這一關鍵環(huán)節(jié),混勻充分對轉染實驗結果影響非常大。
為什么混勻如此重要?
ProteanFect Max作為全·球首·款自組裝蛋白納米顆粒核酸轉染試劑,其高效轉染的秘密在于形成均一且穩(wěn)定的納米復合物。每一步的充分混勻確保了納米顆粒的正確形成,直接影響轉染效率和實驗結果的可重復性。
正確的混勻步驟
ProteanFect凝聚體轉染體系配置雖然簡單,但每一步都需要認真對待:
1. 混合Reagent A與核酸
·將核酸加入Reagent A中
·須混勻(Reagent A使用前需顛倒混勻)
2. 加入Reagent B
·向上述混合液中加入Reagent B
·一定要充分混勻(使用移液槍上下吹打20-30次,大體系渦旋10s)
3. 加入Reagent C(僅原代細胞需要)
·往上述混合物中加入Reagent C
·如觀察到Reagent C溶液有析出,請在65℃水浴至完·全溶解后使用
·一定要充分混勻(使用移液槍上下吹打20-30次,大體系渦旋10s),否則可能會影響細胞活率
正確的混勻方法
·使用移液槍上下吹打20-30次(大約1分鐘)
·或使用渦旋儀混勻10秒
錯誤方法?
·用手指彈管壁
·在桌子上劃蹭混合
·統(tǒng)一加入所有試劑后再一次混勻
·輕微搖晃幾下就認為已混勻
特別提醒
1. 在配置ProteanFect轉染體系過程中,如出現輕微粘稠現象,屬正常現象。
2. 體系配置完成后建議置于冰上保存;如需在室溫下保存,須在30分鐘內使用完畢。
3. 如觀察到Reagent C溶液有析出,請在65℃水浴至完·全溶解后使用。
希望以上提示能幫助您獲得最佳的轉染效果!